pcr技术的特点
1、特异性强
具体表现因素为:引物与模板dna特异的正确结合。遵循引物与模板结合的碱基配对原则,聚合酶合成反应的忠实性及taqdna聚合酶耐高温性让反应模板和引物结合可以再高温下进行,这是具有里程碑意义的。正是由于能在高温下进行,使得每次循环不比再重新添加聚合酶。
2、碱基配对原则
碱基配对原则是dna配对的基本原则,dna内部有4种碱基对,分别是:a、t、c、g,它们之间一一配对。即a-t,c-g。由此可知在一个dna序列中,a+c=t+g,或者a+g=t+c。
什么是动物源性食品
动物源性食品(animal derivedfood)是指全部可食用的动物组织以及蛋和奶,包括肉类及其制品(含动物脏器)、水生动物产品等。
家禽:如猪/鸡/鸭/鱼/兔/奶等
家畜:如猪/牛/羊等大型家畜的肉类食品
野生动物:如野猪/鹳子/野鸡/老鹰/大象等。目前的野生动物源性食品多使用人工饲养的某些动物。
动物源性成分鉴定能反映出样品是否含有特定种类的复肉料。近年来,食用鸡、鸭等肉替代牛羊肉的现象屡见媒体暴光个,制肉制品仲掺杂使情况一直存在。主要原因是部分商家的违法违规,为节省百原料成本全度部或部分已价格较低的猪鸡鸭等肉代替牛羊肉。肉制品由于经过加工工艺后很难从感官区分,从而部分商家有机可乘,造成问肉食品市场以假乱真、以答次充好局面,扰乱市场秩序的健康发展。
由于价格差带来的利益,驱使一些不法之徒在牛、羊、鹿等高价肉中掺杂猪、鸭、鼠等低价肉,甚至过期肉、毒肉或未检疫的肉,这种“掺杂使假”严重侵害消费者经济利益,且威胁其人身健康。因此动物源性成分检测技术成为食品安全的必备技术,目前检测方式主要有两种:基于物种特异蛋白的学方法和特异核酸的核酸检测技术。但是蛋白构象易受到加工过程影响,且用来检测的抗体制备过程繁琐。而基于核酸检测的方式更加方便、快捷,尤其荧光定量pcr 重复性更好,且能准确定量,灵敏度高,因此今年来得到极大应用。目前已有对牛、羊、鸭、马、驴、狐狸等成分检测的商品化试剂盒,常用 taqman 探针法和 sybrg reen 荧光染料法。检测流程一般首先提取动物组织中的核酸,再根据物种特异基因设计引物(和荧光探针),进行实时荧光定量 pcr,收集荧光信号,通过 ct 值判断相应成分有无,也可通过标准曲线进行定量分析。
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